各位宠物医生朋友们，在日常使用 PCR 仪进行病原检测时，您是否也曾在报告上看到过“内标阴性”的结果，感到一阵头疼？

比如内标阴性，靶标阳性：

或者内标和靶标，都是阴性：

遇到这些情况，该如何去处理呢？

内标（Internal Control, IC）是我们加入样本中，一起参与提取和扩增的一段宠物内源性基因片段。它从核酸提取到最终扩增，全程模拟真实的病原检测过程。它的“任务”是证明整个检测流程（从样本采集到仪器运行）是正常运作的。

导致这种情况出现，可能有以下几种原因。

当样本中（靶标）的载量极高时，PCR 反应体系中的原料（如引物、探针、酶、dNTPs 等）会被优先和大量地用于扩增该强阳性病原。这导致剩余的资源不足以支持内标（IC）的有效扩增，从而使内标信号减弱甚至检测不到，呈现阴性。

采集的细胞数量过少，无法提供足够的内源性基因模板，但是采集到了病原。

样本中可能存在某些仅对内标扩增有抑制，但对特定病原扩增无影响（或影响较小）的物质。例如，组织样本中的某些蛋白代谢物、血液中的肝素（抗凝剂）、粪便中的胆汁盐或复杂代谢物等，可能偶然地特异性地干扰了内标引物探针的结合或扩增效率。

样本本身含有抑制核酸扩增的物质。例如粪便样本中的胆汁盐、复杂的碳水化合物、血红蛋白代谢产物，血液样本中的肝素、血红蛋白等。

预处理液管选择失误，如眼鼻口拭子放入了血液预处理液中，导致核酸提取失败。

在检测结果中，曲线和冻干试剂是两个重要的检查指标。一次正常的检测结果中，曲线及冻干试剂应该是如下状态：

原始曲线和拟合曲线相符

a.冻干试剂与卡盒无缝安装；

b.冻干位于管底，无萎缩或脱落

当冻干试剂和曲线均无出现异常，则属于结果正常，无需进行重新采样或测试。这种情况下，靶标曲线和冻干试剂均正常。

希望本文能帮助各位宠物医生更好地理解 IC，让您的 PCR 检测之路更加顺畅高效！

如您无法解决或在检测过程中有任何疑问，请联系我们售后工作人员，为您进行 1 对 1 服务。